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人外周血分離液試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)啦!

更新時間:2017-12-11      瀏覽次數(shù):1401

人外周血分離液試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)啦!

規(guī)格:200 mL/kit
保存:本產(chǎn)品對光敏感,應(yīng)該室溫避光儲存,保質(zhì)期2 年。無菌開封后,保存于室溫。

試劑盒組成:
各種動物外周血白細胞分離液200mL
細胞洗滌液200mL
紅細胞裂解液100mL

操作步驟:

1. 取新鮮抗凝全血(EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝均可)或者去纖維蛋白血液。

2. 在離心管中加入適量分離液(血液體積小于5mL時,加入5mL分離液;大于等于5mL,加入等體積分離液。但二者的總體積不能超過離心管的三分之二,否則會影響分離效果),將血液平鋪到分離液液面上方,注意保持兩液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取血液,然后將血液小心的平鋪于分離液上,因為兩者的密度差異,將形成明顯的分層界面。如果樣品較多,加樣的時間較長,在離心之前出現(xiàn)紅細胞成團下沉屬正?,F(xiàn)象。)

3. 室溫,水平轉(zhuǎn)子500~1000g,離心20~30min(血液的體積越大所需的離心力越大,離心時間越長,*的分離條件需摸索,離心轉(zhuǎn)速zui大不超過1200g)。

4. 離心后將出現(xiàn)明顯的分層:zui上層是稀釋的血漿層;血漿與分離液之間是淋巴細胞層;分離液中為粒細胞層(個體差異或者是分離條件不同,粒細胞層可能分離不明顯);zui下層為紅細胞層。

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5. 小心的吸取淋巴細胞層及分離液層細胞到15mL潔凈的離心管中,10mL PBS或細胞洗滌液洗滌細胞。250g,離心10min(如有紅細胞混雜則加入適量紅細胞裂解液)

6. 棄上清,5mL的PBS或細胞清洗液重懸細胞,250g,離心10min。

7. 重復(fù)步驟6

8. 棄上清,細胞重懸備用。

注意事項:

A. 開封前顛倒混勻,本分離液為無菌產(chǎn)品,為延長分離液保存時間,請在無菌條件下啟封,避免微生物污染。。

B. 分離液使用時應(yīng)始終保持室溫(18℃~25℃),如室內(nèi)溫度較低,可將分離液預(yù)熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心,可能會導(dǎo)致白膜層中紅細胞污染加重。

C. 血液樣本為新鮮抗凝血(采血2 h以內(nèi)),為保持淋巴細胞的活性,應(yīng)避免冷凍和冷藏。

D. 血液樣本不需稀釋,直接進行分離即可。

E. 稀釋血液或洗滌細胞,不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液,其成分會導(dǎo)致血細胞凝集,

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