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植物可溶性糖含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

更新時(shí)間:2019-07-04      瀏覽次數(shù):2020

植物可溶性糖含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

上海信帆生物供應(yīng)植物可溶性糖含量檢測(cè)試劑盒,產(chǎn)品備有大量現(xiàn)貨庫(kù)存,歡迎咨詢!

可見分光光度法

規(guī)格:50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容: 試劑一:粉劑×2 瓶,4℃避光保存;

試劑二:液體 10mL×1 瓶,4℃保存;

標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,4℃保存,含 10mg 無(wú)水葡萄糖(干燥失重<0.2%),

臨用前加入 1mL 蒸餾 水溶解,配制成 10mg/mL 葡萄糖溶液備用,4℃可保存 1 周,或者用飽和苯甲酸溶液溶解,可保存 更長(zhǎng)時(shí)間。

標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至 0.3、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125mg/mL。

產(chǎn)品說(shuō)明: 糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)??偺鞘侵?樣品中的還原單糖及在本法測(cè)定條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的 淀粉。

檢測(cè)原理為蒽酮比色法??捎糜诳扇苄詥翁?、寡糖和多糖的含量測(cè)定,具有靈敏度高﹑簡(jiǎn)便快 捷﹑適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑: 可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、濃硫酸、研缽和蒸餾水。

操作步驟: 一、樣品中可溶性糖的提取: 稱取約 0.1~0.2g 樣本,加入 1mL 蒸餾水研磨成勻漿,倒入有蓋離心管中,沸水浴 10 min(蓋 緊,以防止水分散失),冷卻后,8000g,常溫離心 10min,取上清液于 10mL 試管中,用蒸餾水定 容至 10mL,搖勻備用。

二、測(cè)定操作表:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 620nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 調(diào)節(jié)水浴鍋至 95℃。

3. 工作液的配制:在試劑一中加入 5 mL 試劑二,充分溶解后使用,如較難溶解,可加熱攪拌。

4. 加樣表(在 EP 管中反應(yīng)): 試劑(µL) 空白管 測(cè)定管 標(biāo)準(zhǔn)管 樣本 200 標(biāo)準(zhǔn)液 200 蒸餾水 

混勻,置 95℃水浴中 10min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻至室溫后,于 620nm 處,分別讀 取空白管和測(cè)定管吸光值,?A=A 測(cè)定管-A 空白管。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:620nm 處蒸餾水調(diào)零,讀標(biāo)準(zhǔn)管吸光值,A=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。以濃度(y)為 縱坐標(biāo),吸光度 A(x)為橫坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

注意: 1. 空白管只要做一管。 2. 如果?A 大于 1,需要將樣本用蒸餾水稀釋,計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。 3. 由于濃硫酸具有強(qiáng)腐蝕性,請(qǐng)謹(jǐn)慎操作。

三、可溶性糖含量計(jì)算: 1、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將?A 帶入公式中(x)計(jì)算樣品濃度 y(mg/mL)。 2、按樣本鮮重計(jì)算: 可溶性糖(mg /g 鮮重)= (y×V1)÷(W×V1÷V2)=10×y÷W 3、按樣本蛋白濃度計(jì)算: 可溶性糖(mg / mg prot)= (y×V1)÷(V1×Cpr)=y(tǒng)÷Cpr V1:加入樣本體積,0.2mL;V2:提取液體積,10mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W: 樣本鮮重,g。

植物可溶性糖含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 

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