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β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)測(cè)定試劑盒的操作過程

更新時(shí)間:2023-12-06      瀏覽次數(shù):439

β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)測(cè)定試劑盒的操作過程

 測(cè)外源型 比色法)

一、測(cè)定原理:

β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Glucuronidase,β-GD)作用于專一性底物釋放出游離的酚酞,用比色法測(cè)定游離

酚酞的量表示酶的活力。

二、試劑的組成和配制(50T/48 樣):

試劑一:粉劑×3 支;臨用前每支粉劑中加入 1.0mL 試劑二(外源性),充分混勻后-20℃以下保存;

試劑二(外源性):液體 15mL×1 瓶;4℃保存;

試劑三:液體 100mL×1 瓶;4℃保存

試劑四:1umol/mL 酚酞標(biāo)準(zhǔn) 1mL×1 支;4℃避光保存。

三、操作過程:

1、前處理:

10%組織勻漿上清液的制備:準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g:體積(mL=1:9 的比例,加入 9 倍體積的

生理鹽水,冰水浴條件下機(jī)械勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清液進(jìn)行

測(cè)定。

2. 操作表:

四、計(jì)算公式及舉例:

1、單位定義:每毫克組織蛋白在 37℃條件下,每分鐘能催化生成 1μmol 的酚酞的酶量就是 1 個(gè)酶活力單位。

2、計(jì)算公式:

五、測(cè)定意義:

β-葡糖醛酸苷酶廣泛存在于機(jī)體組織中,除肝、脾、腎上腺外,胃腸道粘膜含量也較豐富,它具有水解

固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖的生理功能。胃癌組織內(nèi)此酶活力要顯著高于十二指腸潰瘍的胃組織,胃癌組織

內(nèi)此酶含量豐富,主要分布于癌細(xì)胞內(nèi);胃癌患者胃粘膜表面覆蓋著具有此酶強(qiáng)活力的膜狀物。這樣當(dāng)含豐富

酶的癌細(xì)胞破碎時(shí),胞漿中此酶即進(jìn)入胃液。測(cè)定胃液β-葡糖醛酸苷酶活力對(duì)于研究胃癌有重要的意義。

β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)測(cè)定試劑盒的操作過程



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