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ELISA試驗操作中,溫育和洗板的注意事項

更新時間:2015-06-09      瀏覽次數(shù):1690

因為ELISA試劑盒靈敏度高,操作簡單等特點,被大家所認可。但是在做ELISA試驗的時候,難免會遇到一些問題,今天我們就溫育和洗板的問題,給大家講解一下需要注意的事項。

溫育是ELISA測定中影響測定成敗zui為關(guān)鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。一些操作者,擅自改變說明書操作,使用自己喜歡的溫育時間和溫育溫度,這樣造成一些不必要的麻煩。因為,不同試劑盒有不同的溫育時間和溫育溫度的選擇,隨意更改溫育時間或者溫育溫度將導(dǎo)致試驗結(jié)果出現(xiàn)偏差。

洗版固相免疫測定技術(shù)是一種非均相免疫測定技術(shù),需以洗滌操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反應(yīng)溫育過程中吸附的非特異成份分離開來,以保證ELISA測定的特異性。洗板對于ELISA測定來說,也是極其關(guān)鍵的一步。洗液盡量不要溢出孔外;加洗液后要靜置1分鐘,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及時更換吸水紙,尤其是拍過酶標記物的吸水紙一定要棄去,否則可能影響試驗結(jié)果。

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