国产精品久久久久久久久久妞妞,九色腾只为高清而生,精精国产xxxx视频在线播放,亚洲人片在线观看天堂无码

熱門搜索: 肌酸激酶MB型同工酶(CK-MM)質(zhì)控樣品 抗血漿鑒別試劑盒 甲種胎兒球蛋白抗原 重組核心鏈霉親和素 2(不帶標(biāo)簽) 重組鏈霉親和素(r-ScSA)(NC膜專用) 重組鏈霉親和素(帶His標(biāo)簽) 羊抗人視-黃醇結(jié)合蛋白多克隆抗體 大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)試劑盒(ELISA) 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA試劑盒 1%豚鼠紅細(xì)胞 2%雞紅細(xì)胞 1%雞紅細(xì)胞 重組人線粒體核糖體蛋白S2(MRPS2) 重組人蛋白酶體激活物亞基1(PSME1)蛋白 重組人肝癌衍生生長因子相關(guān)蛋白3 重組人FAM83A蛋白

PRODUCT CLASSIFICATION

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章/ Technical Articles

您的位置:首頁  /  技術(shù)文章  /  信帆生物告訴大家:WB實(shí)驗(yàn)內(nèi)參的選擇

信帆生物告訴大家:WB實(shí)驗(yàn)內(nèi)參的選擇

更新時(shí)間:2015-12-10      瀏覽次數(shù):1953

檢測一個(gè)基因的表達(dá)產(chǎn)物是否正確,或者比較表達(dá)產(chǎn)物量的相對(duì)變化,方法是western blot。雖然,順利的時(shí)候Western Blot做起來很簡單,可不順的時(shí)候也很令人心煩――做不出結(jié)果啦、假陽性啦、結(jié)果出現(xiàn)多條帶啦、到底是一抗有問題還是二抗有問題啦……畢竟,作為一種有活性的生物大分子,抗體和抗原的反應(yīng)畢竟不象1+1那么明確,而用這種不確定的試劑來測定同樣知之甚少的表達(dá)產(chǎn)物,確實(shí)是有一定的不確定性的。所以,嚴(yán)謹(jǐn)?shù)腤estern Blot實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中要求有良好的參照體系,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析是非常有用的。

我們知道,要用Western Blot比較不同條件下或者不同組織中,目的蛋白表達(dá)量的相對(duì)多少,前提條件是等量的細(xì)胞上樣,才有比較的基礎(chǔ)。特別表達(dá)量不高時(shí),上樣量的差別就很可能影響結(jié)果的分析。艾美捷向您推薦使用內(nèi)參抗體來檢測您的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),或者校準(zhǔn)您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。內(nèi)參即是內(nèi)部參照(Internal Control),對(duì)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)來說一般是指由管家基因編碼表達(dá)的蛋白(Housekeeping Proteins),它們在各組織和細(xì)胞中的表達(dá)相對(duì)恒定,在檢測蛋白的表達(dá)水平變化時(shí)常用它來做參照物。在Western Blotting中使用內(nèi)參其實(shí)就是在WB過程中的另外用內(nèi)參對(duì)應(yīng)的抗體檢測內(nèi)參,這樣在檢測目的產(chǎn)物的同時(shí)可以檢測內(nèi)參的表達(dá),由于內(nèi)參在各組織和細(xì)胞中的表達(dá)相對(duì)恒定,借助檢測每個(gè)樣品內(nèi)參的量就可以用于校正上樣誤差,這樣半定量的結(jié)果才更為可信。此外使用內(nèi)參可以作為空白對(duì)照,檢測蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否*、整個(gè)Western Blot顯色或者發(fā)光體系是否正常。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析其實(shí)很簡單:如果樣品蛋白量有限,只夠進(jìn)行一次電泳轉(zhuǎn)膜實(shí)驗(yàn)時(shí),分別檢測樣品的內(nèi)參量和目的蛋白量。將各樣品目的蛋白量分別除以其內(nèi)參含量,得到的數(shù)值即為內(nèi)參校正后的各樣品中目的蛋白相對(duì)含量,再用此數(shù)值進(jìn)行樣品間的比較和分析,得到目的蛋白含量在不同樣品間的實(shí)際變化結(jié)果。如果樣品量充分,可以先檢測內(nèi)參,觀測樣品間內(nèi)參顯色條帶是否一致,根據(jù)差異大小調(diào)整各樣品的上樣量重新進(jìn)行Western Blotting實(shí)驗(yàn),至內(nèi)參量一致為止;若內(nèi)參一致,即可進(jìn)行不同樣品間目的蛋白表達(dá)變化分析。這樣雖然麻煩一點(diǎn),但是可以保證結(jié)果更有說服力,更可信。畢竟我們的實(shí)驗(yàn)是一種嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鳌?/p>

常用的細(xì)胞總蛋白質(zhì)內(nèi)參有GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)和細(xì)胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin,這其中zui近的國外文獻(xiàn)報(bào)道中使用GAPDH內(nèi)參的較多。對(duì)于一些植物的樣本,則需要特別的植物Actin蛋白作為內(nèi)參;同樣的,如果提取的樣本是細(xì)胞核蛋白,那么PCNA或者組蛋白H3都是被經(jīng)常使用的;而針對(duì)一些研究線粒體的客戶,那么Cox IV則被較多的文獻(xiàn)引用作為線粒體總蛋白的內(nèi)部參考。

微信掃一掃

郵箱:1170233632@qq.com

傳真:021-51870610

地址:上海市顧戴路2988號(hào)B幢7樓

Copyright © 2025 上海信帆生物科技有限公司版權(quán)所有   備案號(hào):滬ICP備13019554號(hào)-1    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

TEL:13764793648

掃碼加微信
黄石市| 人妻少妇乱子伦无码专区| 久久精品国产精品亚洲| 欧美日韩一本| 老色鬼在线精品视频在线观看| 欧美日韩精品久久免费| 中文字幕亚洲精品乱码| 国产免费自拍| 免费在线看黄色| 涩涩五月天| 中文字幕无码第1页| GOGOGO高清免费看韩国| 日产无码精品一区二区三区| 毛片无码国产| 自偷自拍亚洲综合精品第一页 | 办公室撕开奶罩揉吮奶漫画| 女人18片毛片60分钟翻译| a亚洲| 亚洲乱亚洲乱妇50p| 亚洲精品无码中文久久字幕| 久久精品九九热无码免贵| 久久国产亚洲精品超碰热| 温泉县| 色噜噜噜噜噜| 日韩av不卡在线观看 | 亚洲中文无码永久免费| 国产亚洲精品资源在线26U| 亚洲热妇无码av在线播放| 精品亚洲AⅤ在线观看| 国产在线无码精品麻豆| 四虎网址| 兴安县| 日韩中文字幕无码高清毛片| 石柱| 久久久久久无码AV成人影院| 欧美又大又黄又粗高潮免费| 色呦呦视频在线观看| 免费av一区二区三区无码| 亚洲综合色aaa成人无码| 亚洲国产中文综合一区第一页| 综合偷自拍亚洲乱中文字幕|