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β2-微球蛋白(β2-MG)放免試劑盒,提供代測
通用名:碘[ 125I] β2微球蛋白放射免疫分析藥盒
漢語拼音:Dian [ 125I] Beiteerweiqiudanbai Fangshemianyi fenxiYaohe
英文名:Iodine [125I] β2-Microglobulin Radioimmuno Assay Kit
簡稱:碘[ 125I]- β2-MG 放免藥盒 [使用目的] 用于科研血清或尿液樣本中β2微球蛋白(β2-MG)的
定量測定 [研究意義] β2-為微球蛋白(β2microglobulin,β2-MG)是體內有核細胞合成的一種由 100 個氨基酸殘基 組成的球蛋白,分子量為 11.8kD。β2-MG 廣泛存在于淋巴細胞表面及白細胞、血小板、上 皮細胞和間葉細胞的膜上,當組織相容抗原代謝與降解或細胞更新時,以游離形式釋放到體 液中。β2-MG 主要由淋巴細胞產生,而且與淋巴細胞表面識別功能及殺傷細胞受體的作用 有關。β2-MG 在血清和尿中含量極少,血清中的β2-MG 經腎小球過濾后 99.9%被近曲小 管重吸收,隨后被鄰近的管狀細胞分解。另外,由于β2-MG 屬于 HLA 的一條β鏈,任何組 織大量損傷都會造成β2-MG 升高,如燒傷、創(chuàng)傷及腫瘤等。
[試驗原理] 本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理:含β2微球蛋白(β2-MG) 的樣品和 125I 標記的β2微球蛋白(β2-MG)與相應的抗體反應形成抗原抗體復合物。反應 后加入二抗及 PEG,使免疫復合物沉淀,離心,測沉淀放射性計數。通過標準曲線得到樣 本中β2微球蛋白(β2-MG)的濃度。
[試劑主要組成成分] 1、β2-MG 標準品: 一套共 7 瓶,以不含β2-MG 的科研血清為基質,用時輕輕搖勻,需冷存。 β2-MG 標準品濃度 A B C D E F G (單位) 0 0.05 0.2 0.5 1 2 10 mg/ml 2、抗β2-MG 血清: 藍色溶液,需 2℃~8℃冷存。 3、 125I-β2-MG: 紅色溶液,需 2℃~8℃冷存。 4、 質控樣品: 三瓶,需 2℃~8℃冷存 6、 分離劑:藍色溶液,充分搖勻后使用,需 2℃~8℃冷存。
[儀器] 1、 γ-計數器 2、 低溫離心機 3、 恒溫水浴箱
[樣本要求]
1、血清樣品: 110 微升科研血清樣本。 采靜脈血 5ml 于塑料試管中,靜置使其凝固后,1500 轉/分離心,取其上清液,放置玻 璃瓶中。如果樣本不立即使用,可在-18℃~-25℃儲存 6 個月。 嚴重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對測定結果有影響。
2、尿樣品: 5 毫升人尿樣本。 取人尿液 5ml 于塑料試管中, 1500 轉/分離心,取其上清液,放置玻璃瓶中。如果樣 本不立即使用,可在-18℃~-25℃儲存 6 個月。
[實驗方法]
1、 將實驗所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進行編號,所有實驗均做雙管重復;
3、 取標準品 A250µl 加入 NSB 管中;
4、 取每個濃度的標準品、質控品和血清樣本 50µl 或尿樣品 200µl 加入相應編號的 試管中;
5、 每管均各加入 100µl 標記物工作液;
6、 每管均各加入 200µl 抗體工作液,充分混勻;
7、 混勻,放室溫(15~25℃)溫育 0.5~1 小時;
8、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻;
9、 室溫放置 30 分鐘后,離心 3500 轉/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液;
10、 用 γ-計數器測定每管 1 分鐘的放射性強度計數;
11、 從標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。
β2-微球蛋白(β2-MG)放免試劑盒,提供代測